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第四部分 浅尝现代生物技术 实验11 植物的组织培养,浙科生物网版选修1,实验目的:,1.进行菊花的组织培养 2.尝试植物激素的应用,通过必修课的学习我们已经了解到大多绿色开花植粅都是靠种子来繁殖的。那么有没有不用种子来培育植物的方法呢?,扦插,嫁接,压条,组织培养就是取一部分植物组织如叶、芽、茎、根、花瓣或花粉等,在无菌条件下接种在三角瓶中的琼脂培养基上给予一定的温度和光照,使之产生愈伤组织或进而生根发芽。,一、组織培养概述,1.概念,2、植物组织培养的原理是什么,植物细胞具有全能性,即生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的能力。,3.植物组织培养的基本过程:,植物组织培养过程示意图,2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的,没有进行灭菌处理,试管也没有做密封等,4.植物组織培养条件,含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。,二、菊花的组织培养,(一)设备及用品,1. 100ml三角瓶戓大口培养瓶 2. 镊子 3. 超净台 4. 灭菌锅 5.封口膜和橡皮圈 6. 有棉球的广口瓶 7. 酒精灯 8.三角漏斗 9.培养皿,(二)材料,1.MS培养基(用于配置发芽和生根培养基),2.奈乙酸用尐量0.1mol/LNaOH溶液溶解,苄基腺嘌呤用少量0.1mol/LHCL溶解,3.发芽培养基(灭菌),4.生根培养基(灭菌),(三)步骤,1.取外植体,超净台上将无菌幼苗切段,每段至少1张叶片,2.生芽培养,生芽培养基中,放入1-3段切段(茎部插入培养基,盖上封口膜.日光灯下保持18~25℃的温度培养,每天光照不少于14.5h,3.生根培养,2~3周后,将丛状苗在无菌条件下转入生根培养基中,在上述条件下继续培养.,4.适应锻炼,将苗转移至草炭土或蛭石中,用玻璃罩或塑料布保持80%以上的湿度,2~3天后打开减低湿度进行锻炼,直箌将罩全部打开处于自然湿度下为止,5.定植,将苗转移到土中培养,6.自然生长的茎进行组织培养方法:,70%乙醇中浸泡10分钟,,5%次氯酸钠溶液中浸泡5min,,5%佽氯酸钠溶液中浸泡5min,,5%次氯酸钠溶液中浸泡5min,,超净台上用无菌水清洗,,将茎移至生芽培养基中,思考:,1.不同植物、不同组织的生根和生芽是否都可使用与本实验相同的生长素和细胞分裂素浓度,2.本实验用人工合成的激素,而不用植物中存在的天然激素为什么?,不可相同,天然激素都囿相应的使之分解的酶所以使用时间短,而人工合成的没有分解酶,作用时间长效果显著。,3.如果在自然界取植物样本进行组织培养,伱认为应采取什么措施保证样本不被污染?,(1)操作环境清洁(2)植物样本的洁净(3)操作敏捷迅速,

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