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Goldenhar综合征外周血B淋巴细胞永生系的建立及Goldenhar综合征家系致病基因的初步的研究.pdf101页
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博士学位论文 中文摘要 摘要 第一部分
denhar综合征家系及散发病例外周血B淋 巴细胞永生系的建立 目的 采用EB病毒转化淋巴细胞技术，建立Goldenhar综合征家系及散
发病例外周血B淋巴细胞永生细胞系。 方法 收集湖南怀化地区的一个G01denhar综合征家系中目前存活的3
淋巴细胞分离，以EB病毒转化淋巴细胞，并加入环孢素霉A抑制T淋 巴细胞生长，每个血样采用两线同时培养，光镜观察B淋巴细胞的转
化情况。转化后进行细胞株的冻存和复苏，检测细胞冻存后复苏成功
率，用染色体G显带技术进行细胞遗传学检测，分析建系前后家系及
散发病例的核型，并确定其建系的遗传稳定性。 乡±甲 ：口木 培养l周左右，可在倒置显微镜下观察到B淋巴细胞明显母细胞
化，细胞明显增大，细胞周边可见明显的胞质突起，形状各异，聚集
成团。约15d后，可见白色聚集生长的细胞团，1个月左右细胞增殖形
成生长密集的细胞集落。共建成Goldenhar综合征患者外周血永生细
胞株8例，建株成功率loo％，父母等家庭成员建系成功率为
95．8％ 23／24 。所有建成的细胞系冻存l，3，6个月后复苏成功率为 loo％。染色体G显带结果表明，建系前后患者及其家庭成员染色体核
型无异常，排除了大片段染色体畸形导致临床表型的可能性，并表明
建立细胞株的方法稳定。 结论 所有患者及其家庭成员染色体核型正常，成功建立了Goldenhar
综合征患者永生细胞系。 关键词永生细胞系，EB病毒，染色体
博士学位论文 中文摘要 I
denhar综合征家系已知区间1 第二部分Go 4q32检测和 EYAl基因突变筛查 目的 方法
绘制单体型图。
4例散发患者的血样，抽提基因组DNA，然后对EYAl基因编码蛋白
质的外显子3～18进行
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