山东省中小规模猪场猪瘟抗体水平的血清学调查与分析--《养猪》2013年04期
山东省中小规模猪场猪瘟抗体水平的血清学调查与分析
【摘要】：为调查当前中小规模猪场的猪瘟抗体水平,采用IDEXX猪瘟抗体ELISA检测试剂盒对山东省10个地市33个中小规模猪场的698份血清样品进行检测分析。结果显示,全部样品的猪瘟抗体阳性率为76.2%,抗体水平不高;各阶段猪群中以保育猪和肥育猪的猪瘟抗体阳性率较低,阻断率变异系数较大;猪瘟抗体水平随猪场规模的扩大而逐渐上升。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：S858.28【正文快照】：
近年来,猪瘟在我国的流行和发病特点发生了很大变化,从以前频繁发生的大流行转变为周期性、地方性散发流行[1],非典型化成为我国猪瘟发生的主要特点。在当前国内还未大规模推行猪瘟净化的情况下,免疫预防无疑是减少猪瘟发生、控制死亡的最有效手段[2-3]。在我国复杂多样的生
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猪瘟的发生与防治毕业论文
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3秒自动关闭窗口猪瘟流行病学调查及诊断方法建立--《吉林大学》2008年硕士论文
猪瘟流行病学调查及诊断方法建立
【摘要】：
猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)是由猪瘟病毒(CSF Virus,CSFV)引起的严重危害养猪业的重要传染病之一,被国际兽疫局(OIE)列为A类传染病,该病的暴发能造成巨大的经济损失,严重影响国际贸易。本实验主要对临床猪瘟疑似病例进行临床发病调查、病理检查。根据已发表的猪瘟病毒E2基因(囊膜糖蛋白gP55基因)序列,设计并合成了一对特异引物,提取病料的基因组,用RT-PCR扩增病毒的E2基因,连接到T载体上,进行测序序列比对,结果显示分离毒株与猪瘟参考毒株核甘酸同源性为82.5%-94.4%,氨基酸同源性为89.3%-94.0%。同时将病料处理后接种到PK15细胞中,经病毒电镜检测及直接免疫荧光检测共同诊断是否为猪瘟病毒的感染。
经过流行病学分析、临床调查、病理解剖结果表明病猪可能感染猪瘟,因为其具有典型的猪瘟的发病特点,进一步的试验室检查,主要是通过电镜观察、荧光抗体检测均证明其为猪瘟病毒感染。根据猪瘟E2基因合成设计了特异性的引物,建立了猪瘟RT-PCR诊断方法,对该方法的特异性、敏感性、重复性进行了试验,同时利用该方法对猪瘟疑似病料及健康猪的淋巴结和扁桃体进行了检测,阳性率分别为的组织进行了62.9%和11.8%。
【关键词】：
【学位授予单位】：吉林大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2008【分类号】：S858.28【目录】：
内容提要4-8
第一篇 文献综述10-19
第一章 猪瘟病毒结构与功能的研究进展10-15
1 CSFV基因组结构10
2 基因组编码蛋白的功能10-13
3 结论13-15
第二章 猪瘟诊断方法研究进展15-19
1 CSF实验室常用诊断方法15-17
2 CSF分子生物学检测方法17-18
3 结论18-19
第二篇 研究内容19-43
第一章 猪瘟流行病学调查19-24
1 猪场发病情况调查19
2 猪群发病的临床表现19-20
3 病理变化20-22
4 讨论22-23
5 小结23-24
第二章 猪瘟病毒的分离鉴定24-37
1 材料与方法24-31
2 结果31-35
3 讨论35-36
4 小结36-37
第三章 猪瘟RT-PCR诊断方法的建立37-43
1 材料与方法37-40
2 结果40-41
3 PCR诊断方法的应用41-42
5 小结42-43
参考文献44-50
导师简介51-53
作者简介53-54
中文摘要54-55
Abstract55
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淘豆网网友近日为您收集整理了关于猪瘟的诊断及防治毕业论文的文档，希望对您的工作和学习有所帮助。以下是文档介绍：猪瘟的诊断及防治毕业论文 -北京农业职业学院毕业论文修改意见:1、防治里面请结合实际的最新成果。2、论文格式严格按照具体要求修改,逐项对照。3、文中字体、行间距、是否空格等请认真修改。4、符号请使用正确状态。5、请修改参考文献格式。6、其它修改内容请看文中批示。7、正文中要有页眉。8、 5 月 4 日之前给我发到邮箱。论文题目:猪瘟的诊断及防治系别:畜牧兽医专业:动物医学姓名:李颖(20)-指导老师:付静涛论文完成日期:2011 年 4 月 20 日摘要(字体)猪瘟(Classical swine fever)俗称“烂肠瘟”是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、败血性传染病。具有高度的传染病和致死性。急性病例呈败血症的临诊症状。剖检可见内脏器官出血坏死和梗死,慢性经过的病例,主要是纤维素性坏死性肠炎。常用寒及巴氏杆菌病继发感染。主要传染源是病猪,病毒主要经消化道、呼吸道感染。猪不分年龄、性别和品种均易感。一年四季都可发生,春夏多雨季节为多。根据流行病学、临床诊断和病理变化可作出诊断。关键词:猪瘟传染性诊断-目录摘要......................................(来源：淘豆网[/p-2955104.html])............................................................................................................ 21 病原............................................................................................................................................... 52 流行病学....................................................................................................................................... 52.1 易感性............................................(来源：淘豆网[/p-2955104.html]).................................................................................... 52.2 传染源................................................................................................................................ 52.3 传播途径............................................................................................................................ 52.4 流行特点........................................................................................(来源：淘豆网[/p-2955104.html]).................................... 63 临床症状....................................................................................................................................... 63.1 最急性................................................................................................................................ 63.2 急性.................................................................................................................................(来源：淘豆网[/p-2955104.html])... 63.3 亚急性................................................................................................................................ 63.4 慢性型................................................................................................................................ 63.5 温和型................................................................................................................................ 73.6 繁殖障碍.............................(来源：淘豆网[/p-2955104.html])............................................................................................... 74 病理变化....................................................................................................................................... 74.1 最急性型............................................................................................................................ 74.2 急性型........................................................................(来源：淘豆网[/p-2955104.html])........................................................ 74.3 亚急性型............................................................................................................................ 74.4 慢性型................................................................................................................................ 74.5 温和型.....................................................................................................................(来源：淘豆网[/p-2955104.html])........... 84.6 繁殖障碍型........................................................................................................................ 85 诊断............................................................................................................................................... 85.1 病原学诊断........................................................................................................................ 85.1.1 免疫酶染色试验................(来源：淘豆网[/p-2955104.html])..................................................................................... 85.1.2 免疫荧光抗体试验................................................................................................. 95.1.3 病毒分离与鉴定..................................................................................................... 95.1.4 兔体交叉免疫试验................................................................................................. 95.2 血清学诊断...............(来源：淘豆网[/p-2955104.html])......................................................................................................... 95.2.1HC 单抗酶联免疫吸附试验.................................................................................... 95.2.2 荧光抗体病毒中和试验......................................................................................... 95.2.3 过氧化物酶联反应................................................................................................. 9-5.3 病理组织学............(来源：淘豆网[/p-2955104.html])............................................................................................................ 95.4 生物学试验...................................................................................................................... 106 防治措施..................................................................................................................................... 106.1 平时预防措施.................................................................................................................. 106.2 发病时预防措施.............................................................................................................. 10附录................................................................................................................................................ 11参考文献........................................................................................................................................ 11致谢................................................................................................................................................ 11-1 病原猪瘟病原属于黄病毒科瘟病毒属,病毒例子呈粒子球形,核一壳为20面体立体对称,直径38~44nm,有囊膜。基因组为单股RNA。猪瘟病毒只有一个血清型,但存在抗原性差异,病毒的毒力有强、中、弱。不同毒力毒株引起感染的症状、病期、死亡率各不相同。不同毒力毒株引起感染的症状、病期、死亡率各不相同。与牛黏膜病病毒、边界病病毒有共同抗原性。猪瘟病毒存在于病猪的各内脏器官和组织中,所以,在分泌物和排泄物中有病毒存在。以病猪发热体温达最高点时,病毒含量最多。对于有易感性的猪,及微量的病毒可致病。在1g猪粪中含有可以致死数千头猪的病毒。猪瘟病毒对外界环境有一定的抵抗力,在自然干净条件下,病毒易于死亡,污染的环境如保持充分的干燥和较高的温度,经1~3周,病毒即失去传染性。病尸体***2~3天,病毒即被灭活。猪瘟病毒是一种相当稳定的病毒,对许多消毒药都有抵抗力,最有效的消毒药是1%~2%火碱热溶液,或20%~30%热草木灰水,或5%~10%漂白粉液.在冬季为了防冻可于氢氧化钠液中加入5%食盐。(行间距)2 流行病学2.1 易感性本病仅发生于猪,各品种、年龄(包括野猪)都易感。2.2 传染源病猪和带毒猪是最主要的的传染源。病毒分布于病猪的各种组织和体液,以淋巴结、脾和血液中含量最高。病猪由尿、粪便和各种分泌物排除毒物,屠宰时则出血,肉,内脏散布量病毒。2.3 传播途径常随病猪粪尿和口、鼻、眼分泌物将病毒排出体外,污染栏圈,饲料、饮水用具,传染途径主要是消化道,猪食入被污染的饲料或饮水,就能被传染。也可通过呼吸道、眼结膜及皮肤伤口感染,人、动物和昆虫等也可成为间接地传染媒介,促进本病的发生和流行。患病或者弱毒感染的母猪,病毒可以经胎盘感染胎儿,产出弱仔、死胎、木乃伊,有的胎儿产出后先天性震颤、共济失调,存活猪可发生病毒的持续感染。-2.4 流行特点初次感染易感猪群时,往往呈急性爆发。以后逐渐出现亚急性及少数慢性病例。病的后期常继发感染猪霍乱沙门氏杆菌和猪巴氏杆菌并发副伤寒和猪肺疫。出生到两月龄仔猪发病死亡率高产死胎、怀孕母猪流长、木乃伊等繁殖障碍病。3 临床症状潜伏期一般为 5~7d,短的 2d,长的可达 21d。3.1 最急性多见于流行初期,突然发病,表现为高稽留热,体温升高 2 ℃,全身痉挛,四肢抽搐,皮肤和黏膜发绀,全身有出血点,卧地不起,病程为 18d,死亡率 90%~100%3.2 急性这是常见的病型,病猪在出现前体温升高,一般在41℃左右,发热,表现行动缓慢,拱背,头尾下垂,寒战,卧地不起,眼内有多量黏脓性分泌物,甚至眼睑粘连。后期可见颈部、四肢、腹下、耳尖、臀部及***等部位皮下有出血点或出血斑。有脓性结膜炎,病初便秘,先排除干粪球,后排出带白色黏液、黏膜或脓血的深褐色粪球,不久后又出现腹泻,病猪排出灰白色带有恶臭的稀粪。公猪有包皮发炎,用手挤压时,有恶臭浑浊液体射出。有些仔猪可见神经症状,磨牙,运动障碍,痉挛或抽搐等。病程10~20d,死亡率一般在50%~60%之间。3.3 亚急性常见于老疫区或流行中后期病猪,症状与急性型相似,但较缓和,病程为 20~30d,死者常转为慢性型。3.4 慢性型病猪主要表现明显消瘦,精神萎靡,全身衰弱,食欲不振,行走不稳,常伏卧,贫血,有的病猪在耳端、尾尖及四肢皮肤上有紫斑或坏死痂,便秘和腹泻交替发生。病程至少一个月以上,不死亡者长期发育不良成为僵猪。-3.5 温和型病势缓慢,病程较长,病猪体温一般在40~41℃,皮肤无出血小点,但有淤血和坏死。发病率和死亡率均较低,发病和死亡大多为仔猪,较大的猪一般能耐过。病程长达2~3个月。3.6 繁殖障碍妊娠母猪感染后,可致流产,死胎,木乃伊,畸形胎,弱仔。先天感染的外观正常的仔猪,多数陆续死亡,有的终生性病毒血症,长期带毒。4 病理变化4.1 最急性型多无显著特征性病变,一般仅见浆膜、黏膜或内脏有少数出血点。4.2 急性型急性猪瘟以出血变化为特征,全身皮肤、浆膜、粘膜和内脏器官有不同程度的出血变化,以肾和淋巴结的出血最为常见。全身淋巴结肿大,切面周边出血,切面呈大理石样病变。脾脏一般不肿大,边缘可见黑红色隆起的契形出血性梗死灶。肾脏色泽变淡,皮质部有小出血点,肾盂可见到。多数病猪扁桃体出血、坏死。喉头、咽部黏膜有不同程度的出血,膀胱粘膜有散在的出血点。胃、肠粘膜呈卡他性炎症。大小肠系膜有出血点。大肠的回盲瓣处形成纽扣状溃疡。4.3 亚急性型全身出血病变急性型为轻,但坏死性肠炎和肺炎的变化较明显。4.4 慢性型主要病变为坏死性肠炎,全身性出血变化不明显,由于钙磷代谢的扰乱,断奶病猪可见肋骨末端和软骨组织变界处,因骨化障碍而形成的黄色骨化线。该病变在慢性猪瘟诊断上具有一定的意义。-4.5 温和型病变较一些典型猪瘟的变化轻4.6 繁殖障碍型多数仔猪可见水肿,腹腔积水,肾皮质出血和裂缝,胸腺萎缩,腿关节弯曲,皮肤和肾点状出血,淋巴结出血等。5 诊断依据典型临床症状和病理变化可做出初步诊断,对猪瘟及早作出确诊,有利于采取有效方法及时控制猪瘟的发生和流行,尽可能减少经济损失, 确诊需要依靠实验室诊断。5.1 病原学诊断用免疫荧光方法、免疫酶试验检测切片或组织培养物中的病毒抗原。5.1.1 免疫酶染色试验取病猪扁桃体、淋巴结、脾或肾组织加双抗后磨成乳剂,滤过、离心后取上清,接种PK15细胞等,接种48~72h后取出接毒后的细胞片,用HC免疫荧光抗体法或免疫酶染色检查,结果判定同上,也可以用新城疫病毒强化试验鉴定分离物。采取HC早期病猪的扁桃体和淋巴结及晚期病猪的脾和肾或肺组织做冰冻切片或组织切片, ***固定后用HC荧光抗体染色检查, 细胞浆内呈现明亮的黄绿荧光, 判定HC兔化弱毒在猪体内只存在14d,因此注射HC兔化弱毒苗的猪仅在接种后14d内的扁桃体上皮细胞浆内可见到微弱的黄绿色荧光,其染色的亮度和颜色与强毒有较明显的区别。病猪扁桃体、脾、肾、淋巴结做组织压片或冰冻切片,在质量分数为2%戊二醛溶液和甲醛溶液等量混合液中固后用HC酶标记抗体和底物染色镜检,如细胞浆染成深褐色为阳性;黄色或无色为阴性,正常对照应为阴性,HC兔化弱毒接种猪的细胞浆呈微褐色,与强毒株感染有明显区别。-5.1.2 免疫荧光抗体试验5.1.3 病毒分离与鉴定5.1.4 兔体交叉免疫试验猪瘟强毒不引起家兔体温反应,但能使其产生免疫力,而猪瘟兔化弱毒能使家兔发生热反应,但对产生免疫力的家兔则不出现体温反应。利用这一原理,将病料用抗生素处理后,接种家兔7d后再用HC兔化弱毒静脉注射,24h后每6h测温一次,连测3d,如发生定型热反应,则病料中所含的病毒不是HC病毒。同时设3只兔不接种病料作为对照。5.2 血清学诊断目前常用猪瘟病毒强毒株、弱毒株和BVDV单抗体进行血清学试验以测定不同的毒株和病毒感染,常用的方法有:5.2.1HC 单抗酶联免疫吸附试验本试利用猪HC弱毒单抗纯化的弱毒抗原和强毒单抗纯化的强毒抗原鉴别猪瘟疫苗免疫接种后产生的抗体和自然感染强毒后产生的抗体,从而区别猪瘟免疫猪及自然感染猪。5.2.2 荧光抗体病毒中和试验用已定量的HCV检测未知血清的滴度, 即取不同稀释度的被检血清和等量病毒液混合,置37℃感染1h后,接种PK15细胞飞片,同时设置各种对照组,继续培养48~72h后,取出细胞片用荧光抗体法检查,计算每个细胞片中荧光细胞的数目,与对照组比较,能100%抑制荧光细胞的最大血清稀释度即为该血清的抗体滴度。5.2.3 过氧化物酶联反应方法同上,但细胞飞片需用过氧化物酶标记抗体染色检测。5.3 病理组织学非化脓性脑炎的特征(如脑血管套,胶质结节)具有诊断价值,应注意与其他病毒性脑炎相区别,此外淋巴结,肾,脾的组织变化亦可做为诊断参考。-5.4 生物学试验是可靠的诊断方法,特别是对临诊症状不典型的混合感染和慢性猪瘟。方法是将病猪血液或1:10脾组织乳剂作为接种材料,经过滤或加抗生素处理后,接种于未曾注射过猪瘟疫苗的易感健康猪,观察其是否发生猪瘟。6 防治措施6.1 平时预防措施(1)首次免疫最好用单联猪瘟弱毒苗,首免时间25~30日龄。第2次免疫可用猪瘟、丹毒二联苗或三联苗,时间在2月龄(转群时)进行。在紧急预防情况下,对新生仔猪可实施超前免疫,即仔猪出生后立即肌注猪瘟疫苗,预防注射后1h才能吃上第一口初乳(如吃过初乳再注射疫苗,就会被母源抗体干扰,失去免疫效果)。实施超前免疫的仔猪达到35日龄时,必须进行再次免疫。定期用消毒剂消毒。根据实际情况制定免疫程序,一般公猪、繁殖母猪和育成猪每年春秋各注射猪瘟弱毒疫苗1次,对仔猪可采用两种程序:一般情况下,于3~4周龄第1次免疫3~4头份,9~10周龄第2次免疫;生过猪瘟的猪场,新生仔猪在吃奶前注射2头份猪瘟弱毒苗,2h后再自由哺乳8~9周龄时再加免1次。(2)实行自繁自养的办法。若需要从外地购买猪种,运回后须隔离饲养半个月左右,并进行疫苗注射。(3)加强集市管理和运输检疫。杜绝病猪在集市出售、收购、运输。生猪交易市场、猪场、屠宰场等猪只集中场所,特别应加强兽医卫生管理及检疫措施。(4)改善饲养管理。搞好圈舍、环境及相关工具的兽医卫生、消毒工作。(5)目前尚无有效药物治疗猪瘟。早期确诊,及时采取措施,对控制和消灭猪瘟,减少经济损失有重要意义。6.2 发病时预防措施封锁疫点:在封锁点内停止生猪及猪产品的集市贸易和外运,直最后一头猪死亡或处理后 3 天,经彻底消毒,才可封解。处理病猪:病猪及可疑病猪,立即隔离饲养,并对全场的猪进行体温和临床检查。对发病猪场及附近尚未发病的猪只,立即全部用猪瘟兔化弱毒疫苗进行紧急注射(剂量可加大),可有效地制止新的病猪出现,缩短流行过程,减少部分损失。粪、尿及垫草等污物,堆积发酵后作肥料利用。死猪深埋或销毁。消毒:发病猪舍、运动场、饲养管理用具、剩余的饲料和粪水等用 2%热碱水或30%热草木灰水进行消毒。无害化处理猪瘟。播放器加载中，请稍候...
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猪瘟的诊断及防治毕业论文 -北京农业职业学院毕业论文修改意见:1、防治里面请结合实际的最新成果。2、论文格式严格按照具体要求修改,逐项对照。3、文中字体、行间距、是否空格等请认真修改。4、符号请使用正确状态。5、请修改参考文献格式。6、其它修改内容请看文中批示。7、正文中要有页眉。8、 5 月 4 日之前给我发到邮箱...
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