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中国药用植物|介​绍​了​中​国​部​分​实​用​的​药​用​植​物​,​这​些​植​物​多​分​布​在​南​方
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重庆市药用植物园景区规划研究
landscape design of chongqing medicinal plant garden
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官方公共微信药用植物夹竹桃叶活性成分研究--《汕头大学》2010年硕士论文
药用植物夹竹桃叶活性成分研究
【摘要】：
本文对夹竹桃叶的主要成分进行了分析,研究了夹竹桃叶多糖和糖蛋白的提取工艺,对多糖和糖蛋白进一步分离纯化得到纯品后,进行了多糖的结构、单糖的组成及糖蛋白的等电点、分子量的研究。
结果表明,夹竹桃叶鲜样中水分含量约为65.11%,干燥后样品中主要物质含量分别为粗纤维36.05%、糖类9.65%、总蛋白7.26%,总灰分6.32%、多糖6.96%、粗脂肪3.25%、还原糖2.69%,其它27.82%。
在单因素实验基础上,根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,对夹竹桃叶多糖的提取工艺进行了优化。依据回归分析确定各工艺条件的主要影响因素,得到最优工艺条件为提取温度88.2℃,提取时间3.0h,料液比1:45,提取两次多糖得率可达6.73%。
通过乙醇沉淀,除蛋白,脱色,柱层析分离,光谱分析及薄层层析等方法对夹竹桃叶多糖进行分析。结果表明,醇沉、除蛋白、脱色的最佳工艺条件为:4倍无水乙醇沉淀8h,TCA法除蛋白,大孔树脂AB-8脱色。透析后的多糖经DEAE-cellulose 52纤维素柱层析和Sephadex G-200柱层析分离纯化,表明该多糖为均一组分多糖。经分离纯化后的精多糖几乎不含游离蛋白和核酸类物质,且以β-糖苷型吡喃糖为主,单糖组成中含有葡萄糖,可能含有阿拉伯糖、岩藻糖和果糖。
夹竹桃叶糖蛋白提取工艺优化是在Plackett-Burman实验和最陡爬坡实验基础上,根据Box-Benhnken的中心组合实验原理采用三因素三水平的响应面分析法,得到最优提取条件为料液比1:18.5;盐浓度0.03;pH 8.4,在此条件提取一次后夹竹桃叶糖蛋白量可达3.424mg/g。
硫酸铵沉淀,透析后的夹竹桃叶糖蛋白,经DEAE-cellulose 52离子交换层析和Sephadex G-200凝胶过滤层析分离纯化后,得到一个组分较为单一的糖蛋白,该糖蛋白等电点为pH5.9,经SDS-PAGE分析,结果表明,该糖蛋白电泳后有三条条带,分子量约为53kD,29kD和26kD。
【关键词】：
【学位授予单位】：汕头大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2010【分类号】：S567.19【目录】：
Abstract4-6
缩略语6-10
1 夹竹桃研究进展10-13
1.1 夹竹桃的生物学特性10-11
1.2 夹竹桃的生物学功能11-12
1.3 夹竹桃的药理作用12-13
2 药用植物多糖研究进展13-16
2.1 多糖的提取工艺研究14
2.2 多糖除杂工艺研究14
2.3 多糖的分离纯化研究14
2.4 多糖的结构研究14-15
2.5 多糖的生物活性研究15-16
3 药用植物糖蛋白研究进展16-18
3.1 糖蛋白的提取研究16-17
3.2 糖蛋白的分离纯化研究17
3.3 糖蛋白的生物学功能17-18
4 本文研究的意义和内容18-19
4.1 本文研究的意义18
4.2 本文研究的主要内容18-19
参考文献19-24
第一章 药用植物夹竹桃叶成分分析24-31
1 材料与仪器24
1.1 材料及试剂24
1.2 主要仪器及设备24
2 实验方法24-27
2.1 水分的测定24
2.2 蛋白含量的测定24-25
2.3 粗脂肪含量的测定25
2.4 总灰分的测定25-26
2.5 粗纤维的测定26
2.6 总糖含量的测定26
2.7 还原糖含量测定26-27
3 结果与分析27-29
3.1 总糖的标准曲线及方程27-28
3.2 还原糖的标准曲线及方程28
3.3 夹竹桃叶干品各组分含量分析28-29
3.4 夹竹桃叶鲜样中各指标含量29
4 讨论29-30
参考文献30-31
第二章 响应面分析法优化夹竹桃叶多糖的提取工艺31-38
1 材料与仪器31
1.1 材料及试剂31
1.2 主要仪器及设备31
2 实验方法31
3 结果与分析31-37
3.1 单因素对夹竹桃叶多糖得率的影响31-33
3.2 响应面分析法优化夹竹桃叶多糖的提取条件33-36
3.3 验证实验36-37
参考文献37-38
第三章 夹竹桃叶多糖的分离纯化及结构分析38-50
1 材料与仪器38
1.1 材料38
1.2 仪器与试剂38
2 实验方法38-41
2.1 多糖含量和蛋白含量的测定38
2.2 多糖的提取38
2.3 乙醇沉淀工艺条件的确定38-39
2.4 多糖中蛋白的去除39
2.5 多糖液中色素的脱除39-40
2.6 多糖液的透析40
2.7 多糖液的柱层析分离纯化40
2.8 夹竹桃叶多糖的光谱分析40
2.9 夹竹桃叶多糖的单糖组成分析40-41
3 结果与分析41-48
3.1 乙醇沉淀工艺的确定41-42
3.2 蛋白的去除42-43
3.3 色素的脱除43
3.4 柱层析分离纯化43-45
3.5 光谱分析45-47
3.6 夹竹桃叶多糖的单糖组成分析47-48
4 讨论48-49
参考文献49-50
第四章 夹竹桃叶糖蛋白的提取工艺优化50-60
1 材料及仪器50
1.1 材料及试剂50
1.2 主要仪器及设备50
2 实验方法50-51
2.1 夹竹桃叶糖蛋白提取工艺流程50
2.2 夹竹桃叶糖蛋白的提取优化50-51
3 定量分析方法51-53
3.1 多糖标准曲线的制作51-52
3.2 蛋白标准曲线的制作52-53
3.3 夹竹桃叶糖蛋白含量计算53
4 结果与分析53-58
4.1 浸提液中多糖和蛋白含量一致性分析53
4.2 Plackett-Burman 确定主要影响因素实验结果分析53-54
4.3 最陡爬坡实验确定最佳因素水平区域结果分析54
4.4 响应面分析法确定最佳提取工艺54-58
5 讨论58-59
参考文献59-60
第五章 夹竹桃叶糖蛋白的分离纯化及性质研究60-70
1 材料与仪器60
1.1 材料及试剂60
1.2 主要仪器及设备60
2 实验方法60-63
2.1 夹竹桃叶糖蛋白粗提夜的浓缩60
2.2 夹竹桃叶糖蛋白等电点的测定60-61
2.3 夹竹桃叶糖蛋白的硫酸铵分级沉淀61
2.4 夹竹桃叶糖蛋白的透析61
2.5 夹竹桃叶糖蛋白的柱层析分离纯化61-62
2.6 夹竹桃叶糖蛋白糖肽键性质分析62
2.7 夹竹桃叶糖蛋白SDS-PAGE 分析62-63
3 结果与分析63-67
3.1 夹竹桃叶糖蛋白等电点测定63
3.2 夹竹桃叶糖蛋白的硫酸铵分级沉淀63-64
3.3 DEAE-Cellulose 52 离子交换层析64
3.4 Sephadex G-200 凝胶过滤层析64-65
3.5 夹竹桃叶糖蛋白糖肽键性质分析65-66
3.6 夹竹桃叶糖蛋白SDS-PAGE 分析66-67
4 讨论67-68
参考文献68-70
结论与展望70-71
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【参考文献】
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京公网安备74号多花勾儿茶的化学成分及生物活性研究--《中国协和医科大学》2007年硕士论文
多花勾儿茶的化学成分及生物活性研究
【摘要】：
勾儿茶属为鼠李科植物,全世界约有31种,主要分布于亚洲东部及东南部的温带和热带地区。我国有18种,主要分布于西南、华南、中南及华东地区。多花勾儿茶是本属的一个变种,其根部在我国民间用来治疗胆结石,胃痛和风湿关节痛等。本文对产自我国海南省尖峰岭的药用植物多花勾儿茶的根进行了化学成分和生物活性研究。
采用多种色谱方法(硅胶色谱,ODS色谱,凝胶色谱)从多花勾儿茶根的95%乙醇提取物乙酸乙酯部分分离得到了17个化合物,并运用了波谱技术(IR,MS,1D-NMR和2D-NMR)鉴定了它们的化学结构。在所得到的化合物中,12个为蒽醌类化合物,他们分别是:多花二醌A(Floribundiquinone A,1)、多花二醌B(Floribundiquinone B,2)、多花二醌C(Floribundiquinone C,3)、多花二醌D(Floribundiquinone D,4)、多花二醌E(Floribundiquinone E,5)、2-乙酰大黄素甲醚(2-acetylphyscion,6)、10-(chrysophanol-7′-yl)-10-hydroxy-chrysophanol-9-anthrane(7)、大黄素甲醚(physcion,8)、大黄酚(chrysophanol,9)、长孺孢素(Helminthosporin,10)、芦荟大黄素(aloe-emodin,11)、xanthorin12);1个二氢黄酮类化合物(2R,3R)-3,3′,5,5′,7-pentahydroxyflavanone(13):1个五环三萜类化合物羽扇豆醇(lupeol,14),还有2个甾醇类化合物β-谷甾醇(β-sitosterol,15)、胡萝卜苷(β-sitosterol-D-glucoside,16)及1个长链脂肪醇(17)。其中,1-6为新化合物,化合物7、10-13首次从该属植物中分离得到。
药理筛选实验表明,多花勾儿茶95%乙醇提取物的乙酸乙酯层和正丁醇层对半乳糖胺引起的肝细胞损伤具有明显的保护活性,细胞存活率达到了38.0%(1×10~(-4)M),对从乙酸乙酯中分离的化合物1-4、8、9也进行了保肝活性筛选,其中化合物3和4具有较强的保肝活性,细胞存活率分别达到了81.0%(1×10~(-4)M)和76.0%(1×10~(-4)M)。采用MTT法对化合物1-5、7-9、12进行四种肿瘤细胞HCT-8、Bel-7402、BGC-823、A-549和A2780的抗肿瘤药理活性筛选时,未发现有活性成分。
【关键词】：【学位授予单位】：中国协和医科大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2007【分类号】：R284【目录】：
中文摘要4-5
英文摘要5-6
第一章 勾儿茶属植物化学成分及生物活性研究进展概述6-17
2、化学成分6-15
3、药理活性15-17
第二章 多花勾儿茶的化学成分17-36
2、研究结果17-19
3、化合物结构鉴定19-36
第三章 药理筛选结果36-39
1、乙醇提取物的生物活性研究36-37
2、化合物的生物活性研究37-39
第四章 讨论39-42
1、化合物的分离39
2、化合物的结构鉴定39-42
第五章 结论42-43
第六章 实验部分43-52
1、植物来源43
2、仪器与试剂43-44
3、提取分离44
4、药理筛选方法44-45
5、化合物波谱数据45-52
已发表文章和待发表文章52-53
参考文献53-57
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