荧光定量PCR检验报告单_百度宝宝知道你好:我今天做了个荧光定量pcR的报告是上单
在现代都市生活中，大家都越来越好学，那么今天图老师【病毒】栏目为你带来病毒的知识，不了解的朋友们赶紧看看吧！
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图老师答：你这种情况有可能是这种疱疹病毒感染引起的反应情况，可以外用阿昔洛韦软膏治疗什么是mers病毒 什么是mers1、MERS病毒是一种新型的冠状病毒，这种病毒已经被命名为MERS（冠状病毒），大多数MERS病毒感染病例发生在沙特。据有关数据显示，当年肆虐中国的SARS病毒曾经感染八千多人，死亡率是11%。mers的传染性不高，但是死亡率高达40%以上。mers的发展历史2、人体内的冠状病毒最早于1960年代在英国被分离出来，病毒因其表面皇冠状的突起物而得名。它可能与人、猪、猫、狗、鼠和鸡的呼吸系统感染相关。2003年中国出现的SARS病毒就属于冠状病毒。MERS由此成为第六种已知的人类冠状病毒，也是过去10年里被分离出来的第三种。首例MERS病毒感染病例2012年9月在实验室获得确认。据世界卫生组织数据，自那时起，全世界已有228例。大多数MERS病毒感染病例发生在沙特。不过，欧洲也已确认MERS病毒感染病例，但全部病例据信与中东有关系。日沙特阿拉伯确认，一种致命病毒感染病例在过去两周内激增。这种病毒名为中东呼吸综合征冠状病毒（MERS病毒），2012年9月被确认，迄今已致死92人。此前，一个国际医生团队在对MERS病毒进行研究后发布报告称，这种病毒比SARS更易致死。日晚10时世界卫生组织通报：韩国一例确诊中东呼吸综合征(MERS)病例的密切接触者经香港入境广东省惠州市，已出现发热症状。 广东惠州MERS疑似病例韩国亲属2人已确诊。人传人3、日，美国疾病防治中心公布中东呼吸症候群症(MERS)的首例本土个案，这名患者是在卫生人员追踪首例境外移入个案时调查相关接触者过程中发现，这也是美国本土首起人传人事件。感染者曾近距离接触首例境外移入病例，且无出国旅游，当地卫生单位将继续追踪与该名本土个案约60接触者的健康状况。所幸，感染者仅出现轻微类流感症状，居家隔离中，身体状况良好。由于这起事件仍是有限的人传人，美国还不打算改变对MERS的防治措施。对此，专家提醒到中东旅游时，应注意个人卫生及呼吸道防护措施，也要勤洗手，并避免接触骆驼或食用骆驼肉、生饮骆驼奶或其他动物奶水，以降低感染风险。社区传播4、综合起来，该病毒已经在英国、德国、法国、意大利、希腊、突尼斯及菲律宾等地发现。世界卫生组织报告，自2012年首次发现以来，已发现总共496例确认感染病毒患者，已导致沙特阿拉伯至少126人死亡。所有病例均与阿拉伯半岛的七个国家相关联。这种病毒已经通过照料及共居等近距离接触传染给健康人群。然而，还没有证据表明该病毒会在社区持续传播。
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实时荧光定量PCR简介、结果分析及报告-周向阳精要
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数据分析一般流程曲线分析（AmplificationPlot）标准曲线分析（StandardCurve）定值浓度或Ct值数据分析一般流程该步骤主要是对扩增曲线进行整体或单个的调整，主要包括：对数曲线与线性曲线的转换、模板或内标检测探针的选择、基线的调整、阈值的设定等几个方面。数据分析一般流程对数曲线与线性曲线的转换：一般情况下，我们对实验结果的分析都是在线性曲线基础上进行的，因此在实验扩增结束后，需先将对数扩增曲线转换为线性曲线，以便于后续的分析。对数曲线与线性曲线的转换数据分析一般流程检测通道的选择：该步骤主要是由于多色荧光检测在PCR检测中的应用越来越广泛，比如含有内标的试剂，内标的检测通道与目的基因的检测通道不同，因此需根据需求选择不同的通道进行结果分析。对数曲线与线性曲线的转换数据分析一般流程基线的调整：其作用直观反应为曲线基线形状的高低或均一性变化。通常情况下，选择自动分析，此时仪器会针对每条曲线进行优化分析，因此效果通常比较好。在基线自动分析的基础上，如果出现某些形状异常的曲线，则在其他结果分析完成后，再单独对异常曲线进行手动基线调整分析。数据分析一般流程手动基线设定原则：1.基线的结束点应在进入线性期的前几个循环；2.基线开始点应避开反应开始时不稳定的几个循环；3.基线应选择比较平坦的区域；4.基线设定以刚好超过正常阴性对照品扩增曲线的最高点。自动基线与手动基线数据分析一般流程阈值设定：在基线调整后则可进行阈值设定，一般选择人工阈值设定，即通过人为的移动阈值线，到达良好分析效果的目的。阈值的高低直接关系着最后的定量结果的准确性。阈值设定的原则：阈值线一般置于曲线的指数扩增初期，通常是曲线倾斜程度整体一致的地方。阈值线的设定数据分析一般流程整体曲线的观察：分析是否存在污染（主要是试剂污染）；分析是否有因物理或其他因素造成的异常曲线情况；阴性对照分析：观察是否存在污染；阳性对照分析：观察是否在质控范围内；标准品分析：观察标准品分布是否均匀，梯度是否正常，Ct值是否正常；数据分析一般流程该面板主要用于标准曲线参数的分析，通过对曲线各个参数的统计，可以判断实验定量的准确程度或者试剂的稳定程度。其主要包括三个参数：Slope（斜率）、Intercept（截距）和R2（线性相关性）。标准曲线分析数据分析一般流程Slope（斜率）：理论值为-3.32。可以从两个方面来分析，首先是标准曲线的10倍梯度关系，如果梯度正确，斜率数值会比较接近理论值；其次是试剂的扩增效率，当梯度正确的情况下，扩增效率越高越接近理论值。Intercept（截距）：不同公司的试剂截距有很大的不同，主要是指只有1个病毒扩增时，曲线出现的Ct值。R2（线性相关性）：指示本次实验标准品的线性关系。注：优质试剂的标准品每次实验的参数是比较稳定的，做质控分析后偏差应在±2SD范围内，Ct值变异系数应小于10%。数据分析一般流程通过上述步骤分析后，可以得到一个比较准确的定量结果或Ct值，如果在上述步骤中没有记录到异常曲线或者情况，则可以发出正确的报告，对于异常的曲线或者情况，则需单独分析，确定复检的必要性。复检的一般情况-失控阳性质控或阳性样本的失控阴性质控或阴性样本的失控失控的一般情况阳性质控或者样本没有典型的扩增；阳性质控Ct值或者定值偏差在±2SD之外阳性质控或者样本扩增曲线异常，不呈典型的“S”型，如直线倾斜扩增或者折线型；失控的一般情况核酸提取中的随机误差：如核酸提取过程中的丢失、有机溶剂的去除不彻底、标本中产生扩增抑制物的残留、所用耗材存在PCR抑制物等；仪器问题：如扩增仪孔间温度的不均一性、孔内温度与所示温度的不一致性等；试剂问题：如Taq酶和（或）反转录酶的失活、探针的纯度及标记效率和核酸提取试剂的效率等；失控的一般情况纯化核酸：但不能完全避免来自标本核酸提取过程中所混入的去垢剂、有机溶剂的抑制作用；重复性实验：对临床样本进行重复双份测定，避免由于操作的随机性导致结果的误差，同时也可以监测试剂的稳定性；稀释标本：对于含有已知抑制物的标本如强溶血，则可对标本在扩增前进行稀释，再来测定；使用“内质控”：即内标，可以避免由于试剂、扩增仪或标本处理不当所致的假阴性，因此卫生部建议使用带有“内标”的检测试剂；失控的一般情况标本间的交叉污染：如在实验过程中，由于操作不当，或者样本采集不当造成的交叉污染；产物污染：通常指扩增产物泄漏导致的气溶胶污染；试剂污染：如在提取过程中或配制反应液时造成了试剂污染，从而使得检测结果出现污染；失控的一般情况对实验室进行严格的分区使用带“滤芯”的吸头设立“阴性”质控（与标本同时处理）使用防“污染”（含UNG）的PCR试剂报告的基本要求检测结果的报告应准确、清晰和客观；定性测定报告“阴性”或“阳性”，定量测定则以“拷贝数/ml”或“
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核心提示：荧光定量 PCR 检测是反映被检标本中病毒 DNA/RNA 存在的多少，结果通常用数字表示(即 X×10 n copies/ml )，定量检测结果主要是对抗病毒治疗疗效提供检测和参考。
　　荧光定量 PCR 检测是反映被检标本中病毒 DNA/RNA 存在的多少，结果通常用数字表示(即 X×10 n copies/ml )，定量检测结果主要是对抗病毒治疗疗效提供检测和参考。
　　HBV DNA 、 HCV RNA 的定量单位在报告单上通常用“ copies/ml ”表示每毫升的血清或血浆中病毒基因组的个数，该数据越大，表明病毒在人体内的复制越活跃。例如“ HBV DNA=4.3×10 3 copies/ml ”代表每毫升血清中有 4300 个病毒。判断血清或血浆中病毒含量主要看上式中的“10 n ”， n 越大，表示含量越高。治疗过程中， n 变小说明病毒的复制得到控制，治疗有效。通常如果病毒含量下降至 n&3 ，说明病毒基本得到控制;如果病毒含量降至“ 0 ”，则说明病毒在血清或血浆中不存在，病毒的复制已经被抑制。
　　一、“大三阳”与 HBV DNA 检测的关系
　　所谓的“大三阳”，指的是“表面抗原”、“核心抗体”和“ e 抗原”同时阳性。如果病人有“大三阳”，通常说明乙肝病毒在人体内复制活跃， 同时 HBV DNA 检出阳性 ，则说明 病人血液 、 唾液、精液、乳汁都有病毒存在，所以传染性很强，因此“大三阳”与 HBV DNA 是有显著相关的。但“大三阳”和病毒复制之间不能划上等号。例如抗病毒治疗过程中如果 HBeAg ， HBV DNA 均获得转阴，可认为抗病毒治疗疗效显著;如果其中一项阴转，说明有效，但仍需继续抗病毒治疗，直到两项病毒复制指标都转阴为止。事实上，在该类病人中， HBeAg 转阴通常会比 HBV DNA 的转阴有所滞后，因此检查 HBV DNA 是更为直接、及时的判断抗病毒疗效的依局。
　　二、“小三阳”与 HBV DNA 检测的关系
　　所谓的“小三阳”，指的是“表面抗原”、“核心抗体”和“ e 抗体”同时阳性。与“大三阳”相比传染性较小 ， 病毒复制不够活跃，通常认为 HBeAg 阳性转阴继而转为 HBe 抗体阳性是慢性乙肝好转稳定的标志;但是随着研究的深入，人们发现乙肝病毒容易“突变”(即它的基因发生变异)，可造成病毒 e 抗原停止表达，转换为“小三阳”，实际上该类患者体内的 HBV DNA 可能仍然存在活跃的复制，其传染性仍很强，且变异后的病毒更不易清除，也特别容易进展到。这种情况可能比“大三阳”危害更大，所以就更应做 HBV DNA 定量分析，以确定是否需要治疗和观察抗病毒疗效。实际情况也显示“小三阳”患者的核酸检测中有相当比例是 HBV DNA 阳性。
　　三、 HCV 抗体与 HCV-RNA 检测的关系
　　HCV 抗体阳性代表机体受到过 HCV 的感染，可在病毒清除后仍长时间存在，有报道说该时间可长达 9 年，因此无法准确判别 HCV 抗体阳性是否有病毒血症。而 HCV –RNA 是丙型肝炎的确诊指标。
（责任编辑：陈战锋）
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