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【摘要】:目的构建旋毛虫Ts87抗原基因并在毕赤酵母中分泌表达方法通过PCR特异性扩增Ts87抗原基因,构建重组质粒PPICZαA-Ts87。其线性化后,转化毕赤酵母GS115,抗生素Zeocin筛选高抗性转化子,PCR筛选阳性重组菌株表型鉴定后进行甲醇诱导表达,收集培养不同天数的上清液。斑点杂交法分析上清液以确定有无重组蛋白分泌表达十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blotting)分析鉴定表达蛋白。结果与结论成功构建了PPICZαA-Ts87毕赤酵母表达重组质粒,确定了Ts87抗原基因在毕赤酵毋中获得分泌表达
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