westernblot条带如何看 blot结果图是这样的,是怎么显色的?

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电泳结束后用转移缓冲液清洗凝胶。剪一张与胶大小相当的硝酸纤维素膜用ddH2O处理5 min,再注入转印缓沖液中处理10 min;剪四张比凝胶稍大的滤纸用转移缓冲液浸湿,将其中两张平铺于电转移装置上然后将凝胶平铺于滤纸上,用玻璃棒在凝膠上轻轻滚动赶走气泡;将处理好的PVDF膜平铺一凝胶表面,用玻璃棒在膜上轻轻滚动以除去气泡;将另两张滤纸平铺于硝酸纤维素膜上並用玻璃棒除气泡,然后将滤纸/凝胶/膜/滤纸/夹层放入电转移装置内注意凝胶面朝负极;恒压45 转移完毕后,将硝酸纤维素膜在PBS(pH 7.4)中漂洗2 min;将膜置于封闭液中(含3% BSA的PBS)于25 ℃ 低速振荡封闭2 h;回收封闭液,将膜浸入用含3% BSA的PBS适当稀释的抗His的一抗溶液中(1:1200)25 ℃ 低速振荡2 h;膜用PBS(pH 7.4)先快速洗二次,每次2 min然后洗三次,每次15 min;把膜转移到用含3% BSA的PBS按1:500稀释的HRP标记的二抗中于25 ℃低速振荡2 h;膜用PBS(pH 7.4)先快速洗二次,每次2 min然后洗三次,每次15 min;将膜浸入DAB显色液中避光显色5分钟;用蒸馏水终止显色反应。

    不知道邀请谁试试他们

  • 政治敏感、违法虚假信息

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