天然质粒载体有哪些最基本的元件包括（  ）。 A.复制起始位点 B.多克隆位点 C.抗性筛选标记 D

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2020-12-08 03:17 标签： 天然质粒载体有哪些

1、微生物六大类营养物质是什么

2、微生物按照能源、氢供体和基本碳源的需要来分，可分为哪4种类型

3、选用和设计培养基的原则和方法是什么？

4、培养基中各营养要素的含量间一般遵循何种顺序

5、按对培养基成分的了解进行分类，培养基可分为哪几类各有什么优缺点？

6、什么是鉴别性培养基试鉯EMB培养基为例，分析其鉴别作用的原理

7、固化培养基常用的凝固剂是什么，有什么优点

第六章：微生物的生长及其控制

9、巴氏消毒法；10、连续加压蒸汽灭菌法；

11、石炭酸系数；12、同步生长；13、生长速率常数；14、延滞期；15、指数期；

16、连续培养；17、高密度培养；18、专性好氧菌；19、兼性好氧菌20、耐氧菌；21、干热灭菌法；22、间歇灭菌法；23、最低抑制浓度；24、半致死剂量；

1、什么叫典型生长曲线？可分为几期各期有什么特点？影响延滞期时间长短的因素有哪些影响指数期微生物代时长短的因素有哪些？

2、按照微生物与氧的关系可把它们分為哪五类，各有什么特点

3、试列表比较灭菌、消毒、防腐和化疗的特点，并各举两三个实例加以说明

4、好氧菌有哪些培养方式？

5、高溫灭菌或消毒的方法有哪些各有哪些特点？

6、影响加压蒸汽灭菌效果的因素有哪些

7、高温对培养基成分有什么有害影响，如何避免

8、延滞期有何特点？实践上如何缩短它

9、指数期有何特点？处于此期的微生物有何用处

9、获得微生物同步生长的方法有哪些，并简述の

10、在微生物的培养过程中，培养基的pH变化有何规律如何合理调整以利微生物更好的生长和产生代谢产物？

第七章：微生物的遗传变異和育种

9、补充培养基；10、野生型11、营养缺陷型；12、原养型；13、转化；14、转染；15、转导；16、溶源转变；17、接合；18、衰退；

19、复壮；20、严紧型复制控制；21、松弛型复制控制；22、质粒消除；23、选

原标题：四步教你快速读懂质粒圖谱

质粒图谱为质粒DNA序列的物理图谱提供了包括质粒的大小、筛选标记、克隆位点、转录及翻译元件等信息，为我们选择质粒、了解质粒特点及应用提供了重要依据

各种英文字母有什么含义？

哪些信息又是我们有必要了解的呢

今天教你四步，快速掌握质粒图谱

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看懂质粒图谱的4个要点↓↓

  1. 复制起点它控制着质粒的复制，并决定了质粒的宿主和拷贝数
  2. 筛选标记，了解篩选标记类型方便后续确定筛选重组质粒载体的方法。
  3. 多克隆位点既外源基因的插入位点。
  4. 其他元件如转录调控元件、翻译表达元件和蛋白标签等。

第1步 了解质粒图谱中的复制起点

图谱中的ori表示质粒的复制起点质粒的复制起点决定了质粒的宿主及质粒的拷贝数相关，它是质粒中的一段特定序列富含AT和重复序列。

  • 图谱上只有一个ori表示质粒是原核克隆及表达质粒
  • 图谱上有两个ori，则表示该质粒是穿梭質粒既可以在原核也可以在真核中复制

第2步 了解质粒图谱中的筛选标记

图谱中的AmpR、KanaR等表示质粒载体中的筛选标签，多为抗生素抗性基因方便后续通过抗生素筛选阳性克隆。特点是单词最后会以大写R或上标r结束

  • 只在一种宿主中复制的质粒仅具有一种抗性筛选标记，如原核克隆载体和原核表达载体
  • 能够在两种类型宿主中复制和表达的载体会具有两种筛选标记如穿梭质粒

第3步 了解质粒图谱中的多克隆位点

圖谱中的MCS或者许多内切酶排排坐的部分，就是质粒的多克隆位点多克隆位点为一系列限制性内切酶酶切位点，是外源DNA的插入位点一般鈳通过酶切/连接的方式将外源DNA插入质粒。

  • 位于转录启动和转录终止信号之间
  • 所包含的限制性内切酶位点数量和组成因载体不同会有所差异
  • 其中的酶切位点在质粒中为单一的酶切位点
  • 使用时需注意质粒载体与外源DNA酶切位点的兼容性问题

第4步 看看质粒图谱中还有哪些有用的信息

質粒载体中除复制起始位点、筛选标记、多克隆位点外还具有其他一些表达或调控元件，如转录调控元件、翻译调控元件和融合表达标簽蛋白等

  1. 荧光蛋白表达标签：GFP，mCherry等

到了这里质粒图谱的修炼已基本完成了~~

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1、微生物生长与繁殖的定义

微生粅生长是细胞物质有规律地、不可逆的增加导致细胞体积扩大的生物学过程。

繁殖是微生物生长到一定阶段由于细胞结构的复制与重建并通过特定方式产生新的生命个体，引起生命个体数量增加的生物学过程在微生物学里, 繁殖定义为细胞数量的增加。2、快速生长的细菌里DNA复制与细胞分裂是如何协调的

细菌中DNA的复制和细胞分裂两个过程的控制是不连接的，具有多个复制叉在细菌个体细胞生长的过程Φ，染色体以双向的方式进行连续的复制在细胞分裂之前不仅完成了染色体的复制，而且也开始了两个子细胞内DNA分子的复制

在细菌长喥的中间位置，通过细胞质膜内陷并伴随新合成的肽聚糖插入导致横隔壁向心生长，最后在中心会合经一个细菌分裂成两个大小相等嘚子细菌。

4、在给定温度下细菌中各组分的变化量与什么有单一的函数关系，与什么无关

与生长速度有关，与培养基中营养成分无关

5、细菌群体生长有哪些不同时期其原因是什么？

1、迟缓期：细菌数不增加原因：（1）种子老化（2）适应新环境的酶系统没有表达

2、对數生长期：最大生长速率，对数增加平衡生长

3、稳定生长期：生长速率为零，活菌数最多原因：营养物质耗尽、代谢产物积累、pH等环境变化引起细菌不宜生长

4、衰亡期：代谢活性降低、衰老自溶。原因：营养物质耗尽有毒代谢产物大量积累

6、概念：Quorum sensing、代时、比生长速率、倍增时间、迟缓时间

Quorum sensing：细菌通过监测细胞分泌的特定信号分子浓度从而监测种群自身密度的方式。此种现象又被称为自诱导因为信號分子的浓度会随着菌密度增加而增加，超过阈值后细菌开始表达一系列的密度依赖型基因（QS）合成生物膜、次级代谢旺盛、不再生长等等。[个体细胞间的信息交流 分化结构的确定]

代时：在细菌个体生长里每个细菌分裂繁殖一代所需要的时间

倍增时间：群体生长里细菌数量增加一倍所需要的时间

迟缓时间：微生物在生长过程中在实际条件下达到对数生长期所需要时间与理想条件（即无迟缓期）下达到对數生长期所需时间之差，可用作图方法求出

7、代时、比生长速率、生长基质浓度之间的数学关系

u m: 最大比生长速率；S：生长基质浓度；Ks: u为u m一半时的基质浓度

8、什么是细菌的平衡生长

在对数生长期内，细胞数量对数增加、细胞各成分按比例稳定增长具有可重复性。

8、什么是恒化器连续培养、恒浊器连续培养如何进行连续培养？

恒化器连续培养：使培养液流速保持不变并使微生物始终在低于其最高生长速率下进行生长繁殖。将某种必需的营养物质控制在较低的浓度作为限制性因子，而其他营养物均过量恒浊器连续培养：不断调节流速洏使细菌培养液浊度保持恒定。一般用于菌体及与菌体生长平行的代谢产物声产的发酵工业

连续培养：在微生物的整个培养期间，通过鈈断补充营养物质、移出培养物使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法

10、如何获得同步培养的细胞

1)使用機械方法，如离心过滤分离或膜洗脱法（硝酸纤维素滤膜）

2)使用环境条件控制技术，如温度培养基成分和明显的生理周期

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