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CCK-8CCK-8
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CCK-8细胞增殖检测试剂盒
产品编号 : JK-021
产品规格 : 500T
价格（RMB） : 380
生产商 : 经科
JK-021&热销
CCK-8试剂盒(经科)
CCK-8试剂盒(同仁化学)
CCK-8试剂盒(同仁化学)
CCK8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较
甲臜产物的水溶性
差（需加有机溶剂溶解再检测）
配成溶液后使用
检测灵敏度
高，细胞形态完全消失
很低，细胞形态不变
很低，细胞形态不变
很低，细胞形态不变
试剂稳定性
批量样品检测
CCK-8用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验
CCK-8试剂盒在国内知名科研院所、重点大学、三甲医院被广泛应用，国际认可度高，使用CCK-8发表的中外文献达600多篇，其中截止08年底SCI影响因子IF＞10分的论文有37篇，最高IF38.5分
[Heterozygosity with respect to Zfp148 causes complete loss of fetal germ cells during mouse embryogenesis,Nature Genetics&33, 172 - 176 (01 Feb 2003)]
&CCK-8试剂与MTT等方法灵敏度比较
&CCK-8试剂毒性：CCK-8和其他检测方法对比可以得出&&CCK-8对细胞几乎无毒性，不伤害细胞，细胞可重复利用
&& CCK-8&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& P公司产品&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& R公司产品
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【求助】质粒转染做CCK-8
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这个帖子发布于2年零292天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
最近打算做Hela的质粒转染检测细胞增殖，想请教是先在6孔板转染后消化计数接种96孔板，还是直接接种96孔板后转染，我有四组别，如果6孔板转染后消化计数，操作时间常，误差大，对细胞影响应该也挺大，但是96孔板直接转染没有做过，每孔加多少脂质体和质粒呢？谢谢了
不知道邀请谁？试试他们
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96孔板直接转染，转染试剂的说明书上应该有
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是的，我们有这个转染说明书，只是没这样做过，想问问这样差距大不大
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你需要测的样品多吗？如果不多的话用24孔板养细胞转染要好一些，比用96孔板转染要好，直接用24孔板做cck-8就可以，或者48孔板，我认为都比直接用96孔板直接转染要好，毕竟96孔板每个孔的细胞很少，转染细胞的损伤还是挺大的，你要保证一定的细胞量结果才稳定可靠。
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好的，谢谢了，我也是觉得96直接转染细胞死亡后就不够了，谢谢??的建议
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一、CCK8检测细胞增殖/毒性的原理
Cell Counting Kit-8（简称）试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验
CCK8的优点：使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂；CCK-8法能快速检测；CCK-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度；CCK-8法的重复性优于MTT 法；CCK-8法对细胞毒性小；CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。
CCK8的缺点：与MTT法相 比，CCK8和XTT的价格比较贵。CCK8试剂的颜色为淡红色，与含酚红的培养基颜色接近，不注意的话容易产生漏加或多加。
与以往的增殖/毒性测定试剂相比较：
检测方法MTT法XTT法WST-1法CCK8法甲臢产物的水溶性差（需加有机溶剂溶解）好好好产品性状粉末2瓶溶液溶液1瓶溶液使用方法配成溶液后使用现配现用即开即用即开即用检测灵敏度高很高很高高检测时间较长较短较短最短检测波长560-600nm420-480nm420-480nm430-490nm细胞毒性高，细胞形态完全消失很低，细胞形态不变很低，细胞形态不变很低，细胞形态不变试剂稳定性一般较差一般很好批量样品检测可以非常适合非常适合非常适合便捷程度一般便捷便捷非常便捷
二、CCK8检测细胞增殖/毒性的方法
实验一：细胞增殖分析
1、制备细胞悬液：细胞计数2、接种到96孔板中：根据合适的铺板细胞数，每孔约100ul细胞悬液，同样的样本可做3个重复。3、37℃培养箱中培养：细胞接种后贴壁大约需要培养2-4小时，如果不需要贴壁，这步可以省去。
4、加入10ul CCK8：由于每孔加入CCK8量比较少，有可能因试剂沾在孔壁上而带来误差，建议在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀。或者直接配置含10%CCK8的培养基，以换液的形式加入。
5、培养1-4小时:细胞种类不同，形成的Formazan的量也不一样。如果显色不够的话，可以继续培养，以确认最佳条件。特别是血液细胞形成的Formazan很少，需要较长的显色时间（5-6小时）。6、测定450nm吸光度：建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。
实验二：细胞毒性分析
1、制备细胞悬液：细胞计数2、接种到96孔板中：根据合适的铺板细胞数，每孔约100ul细胞悬液，同样的样本可做3个重复。3、37℃培养箱中培养：细胞接种后贴壁大约需要培养2-4小时，如果不需要贴壁，这步可以省去。4、加入不同浓度的毒性物质5、37℃培养箱中培养：加入毒性物质的培养时间，要看毒性物质的性质和细胞的敏感性，一般要根据细胞周期来决定，起码要一代以上的时间。
6、加入10ul CCK8：由于每孔加入CCK8量比较少，有可能因试剂沾在孔壁上而带来误差，建议在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀。
7、培养1-4小时:细胞种类不同，形成的Formazan的量也不一样。如果显色不够的话，可以继续培养，以确认最佳条件。特别是血液细胞形成的Formazan很少，需要较长的显色时间（5-6小时）。8、测定450nm吸光度：建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。
若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK8之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
三、CCK8检测细胞增殖/毒性的注意事项
当使用标准96孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100 μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100 μl 培养基)。酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰，可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。CCK8可以检测大肠杆菌，但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染，以免影响结果。CCK-8在0-5℃下能够保存至少6个月，在-20℃下避光可以保存1年。当在培养箱内培养时，培养板最外一圈的孔最容易干燥挥发，由于体积不准确而增加误差。一般情况下，最外一圈的孔只加培养基，不作为测定孔用。在培养基中加入CCK8，培养一定的时间，测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验时，还应考虑药物的吸收，可在加入药物的培养基中加入CCK8，培养一定的时间，测定450 nm的吸光度作为空白对照。金属对CCK-8显色有影响：当终浓度为1 mM的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会抑制5%、15%、90%的显色反应，使灵敏度降级。如果终浓度是10 mM的话，将会100%抑制。悬浮细胞由于染色比较困难，一般需要增加细胞数量和延长培养时间。
（乐研生物 ）
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学习了，就是CCK8价格有点高，有没有差不多，但性价比更高的替代产品？
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向楼主的分享精神致敬
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向楼主的分享精神致敬
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这个不错，谢谢共享
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CCK-8检测细胞增殖实验的灵敏度比MTT、XTT及MTS更高，数据可靠，重复性好，操作简便且无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞几乎没有毒性，尤其适合于悬浮细胞高通量药物筛选。在这里推荐您使用北京英格恩生物的CCK8试剂盒，最快速（直接使用）、准确（很低毒性，稳定）。CCK8细胞毒性非常小，可以加入细胞中长期培养，结果很稳定
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