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黔西南州67例狂犬病流行病学调查
优质期刊推荐2356例暴露后狂犬病预防流行病学调查--《中国热带医学》2010年02期
2356例暴露后狂犬病预防流行病学调查
【摘要】：正狂犬病是人畜共患病,犬是狂犬病的主要传染源,一旦感染上狂犬病病毒,病死率为百分之百,预防狂犬病的最关键手段,是在被犬等动物咬伤之前或之后,采取相应的防控措施,为
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【分类号】：R512.99;R181.3【正文快照】：
狂犬病是人畜共患病,犬是狂犬病的主要传染源,一旦感染上狂犬病病毒,病死率为百分之百,预防狂犬病的最关键手段,是在被犬等动物咬伤之前或之后,采取相应的防控措施,为了解人群对狂犬病知识掌握程度,以及暴露后预防狂犬病所采用的方法,现对2356例暴露后进行狂犬病流行病学调查
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京公网安备75号狂犬病病毒感染抑制神经元内微管相关蛋白EB3及p140cap表达的研究--《吉林大学》2015年硕士论文
狂犬病病毒感染抑制神经元内微管相关蛋白EB3及p140cap表达的研究
【摘要】：狂犬病是由狂犬病病毒（RABV）引起的一种以神经系统感染为特征的烈性、致死性人兽共患传染病。发病动物有明显的神经症状，如：恐水、恐声、惊厥等。在RABV感染的成年鼠脑组织切片中能够看到轴突、树突呈串珠样改变和肿胀，这些变化与神经元细胞骨架结构的改变密切相关。微管作为细胞内最重要的骨架类型，其结构的稳定性直接决定了细胞的正常功能。为研究神经元细胞微管和RABV致病性的关系，本研究在观察到RABV感染引起神经元微管结构改变的基础上，通过检测影响微管稳定性的相关蛋白在转录，翻译及细胞内分布的变化，研究RABV感染与神经元微管相关蛋白变化的关系，这些研究可为对RABV感染致神经功能异退化机制的研究提供理论依据，并为进一步研究RABV发病机制奠定基础。
本研究首先通过对乳鼠脑内接种RABV固定毒株进行病毒扩增，并测定病毒滴度。随后对能够影响细胞骨架稳定性的相关基因进行筛选，包括EB3、p140cap、Rbl2、Tppp、Vasp、Fascin1、Tesk2、GIT2及Ena，并从中挑选变化明显的转录异常基因进行下一步研究。之后通过实时定量PCR、Western blot及免疫荧光对基因转录水平、蛋白水平、细胞内分布进行检测，然后通过Westernblot检测其下游蛋白的活性。最后，以该基因在CVS感染神经元内的异常表达为基础，研究RABV街毒株MRV对该基因转录、蛋白及细胞内分布水平是否有相似影响，以进一步探究狂犬病病毒街毒株致神经元功能异常的机制。
结果显示，对挑选的9个微管相关基因的实时定量PCR检测发现，EB3、p140cap、Rbl2、Tppp、Vasp、Fascin1、Tesk2及Ena等8个出现转录异常，从中挑选2个异常的相关基因EB3、p140cap及p140cap下游蛋白Rac1进行研究。首先对CVS感染不同时间神经元内EB3转录和翻译水平的动态变化进行实时定量PCR及Western Blot检测。结果显示，CVS感染1h后，与对照组相比，EB3mRNA量和蛋白量都有明显的降低。且随着时间延长，mRNA量和蛋白量进一步降低，与对照组差异更加明显。免疫荧光实验结果显示，CVS感染48h，神经元胞体内有少量病毒特异性光斑，EB3较连续地分布于突起；感染96h，在胞体和突起病毒光斑增多，EB3呈斑状杂乱地分布于突起及胞体膜内侧，失去在正常神经元上的点状分布状态。对p140cap进行动态检测发现，CVS感染1h之后，在转录及翻译水平上也有明显的下降。对p140cap下游蛋白Rac1活性检测发现CVS感染能够明显抑制Rac1的活性。对MRV感染的神经元EB3、p140cap转录、表达水平及分布检测，证实EB3的转录及翻译水平下调。在感染96h后，EB3呈散沙状均匀分布于突起上。同时还发现，MRV感染能抑制p140cap转录，但对其蛋白表达下调作用不明显。
通过本研究，可以得出以下结论：1、CVS感染引起EB3（↓）、p140cap（↓）、p130（↓）、Tppp（↓）、GIT2（↓）、Fascin1（↓）、Ena（↓）及Tesk2（↑）等基因转录异常，抑制EB3及p140cap的表达，改变EB3细胞内定位，从而影响神经元MTs的稳定性。CVS感染对Rac1活性的抑制，可能通过EB3—p140cap—Rac1信号途径而影响微丝的重排。2、RABV街毒株MRV能够抑制EB3表达并改变其细胞内定位，对p140cap表达影响不明显。
【关键词】：
【学位授予单位】：吉林大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2015【分类号】：R512.99【目录】：
中文摘要5-7Abstract7-12引言12-14第一篇 文献综述14-25 1 狂犬病病毒及其致病机制研究进展14-19
1.1 狂犬病的危害14
1.2 RABV 的形态及结构14-17
1.3 RABV 与神经功能异常17-19 2 微管与神经系统疾病的研究进展19-25
2.1 微管在神经系统中的功能19-21
2.2 哺乳动物细胞中微管的调节方式21-22
2.3 微管正极端追踪蛋白22-23
2.4 细胞骨架与神经损伤及疾病23-25第二篇 研究内容25-59 第1章 CVS 感染致微管相关转录异常基因的筛选25-41
1.1 材料与方法25-34
1.2 结果34-39
1.3 讨论39-40
1.4 小结40-41 第2章 CVS 感染对 EB3 及 p140cap 表达的影响41-53
2.1 材料与方法41-45
2.2 结果45-50
2.3 讨论50-52
2.4 小结52-53 第3篇 MRV 感染对 EB3 及 p140cap 表达的影响53-59
3.1 材料与方法53
3.2 实验结果53-57
3.3 讨论57-58
3.4 小结58-59结论59-60参考文献60-70导师简介70-71作者简介及硕士期间所取得的研究成果71-72致谢72
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狂犬病病毒核酸RT-LAMP检测方法的建立
目的 建立RT-LAMP方法,实现对狂犬病病毒核酸的快速、灵敏、简便的检测.方法 针对狂犬病病毒的核衣壳蛋白基因(N基因)和大转录酶蛋白基因(L基因)中的高度保守区段分别设计了一套引物,建立了检测狂犬病病毒的快速一步式反转录～环介导恒温扩增(RT-LAMP)方法.样品提取总RNA后,加入BstDNA聚合酶、各种反应成分,于63℃恒温水浴箱中放置60min,80℃5min终止反应,加入荧光染料SYBR GREEN I,根据颜色变化肉眼判定结果.结果 两套引物对狂犬病病毒RNA进行RT-LAMP检测,均有良好的特异性,灵敏度均比RT-巢式PCR高10倍以上.结论 该方法简单、快速,不需电泳,利用染色剂肉眼判定结果,不需要大型仪器,能在70min内完成对狂犬病病毒RNA的检测,适用于可疑动物的快速检测,尤其适合基层使用.
HUANG Yuan
XIANG Rong
ZHANG Jian-fei
作者单位：
广东省农科院兽医研究所,广东省兽医医公共卫生公共实验室,广州510640
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十堰市某综合医院狂犬病暴露及处置流行病学分析
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