环境激素——人类健康的隐形杀手--《农产品质量安全与现代农业发展专家论坛论文集》2011年
环境激素——人类健康的隐形杀手
【摘要】：环境激素(Environmental Hormones),是指由于人类的生产和生活而产生并释放到环境中,且在环境中持久存在的,通过直接或间接的方式在动物和人体内蓄积,能与激素受体结合起激素样作用,引起内分泌系统和神经系统紊乱,使机体生殖机能、免疫机能和内分泌机能等出现异常的化学物质,也称"环境荷尔蒙"。由于它们是从外界环境进入人体,并产生类似激素的作用,所以又称其为"环境内分泌干扰物"(Environmental endocrine disrupting chemicals,EDCs)。有科学家预言,环境激素已成为继臭氧层破坏、地球气候变暖之后的第三大全球性环境问题,被喻为威胁人类存亡的"定时炸弹"。环境激素问题已经成为国际生物医学和环境科学领域中的热门研究课题。目前,发达国家正以巨大的投入,研究环境激素的种类、污染途径、主要污染源、生态危害、分子作用机理、污染控制和防治对策。本文通过查阅近年来国内外研究进展,以及本研究室近些年在环境激素方面的研究成果,对环境激素的分类、作用特点及其对人和动物健康的危害及作用机理等问题进行了综述。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：R114【正文快照】：
环境激素(Environmental Hormones)是指由于人类的生产和生活而产生并释放到环境中，且在环境中持久存在的，通过直接或间接的方式在动物和人体内蓄积，能与激素受体结合起激素样作用，引起内分泌系统和神经系统紊乱，使机体生殖机能、免疫机能和内分泌机能等出现异常的化学物
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出门在外也不愁酚类内分泌干扰物的雌激素受体结合能力及其对相关生物酶活性的影响研究--《中国海洋大学》2010年硕士论文
酚类内分泌干扰物的雌激素受体结合能力及其对相关生物酶活性的影响研究
【摘要】：
内分泌干扰物(EDCs)广泛存在于人类生活和工作环境中,并可通过食物链或其他途径进入动物和人体,干扰机体正常的内分泌功能,包括对生殖系统,神经系统和免疫系统的危害等。拟雌激素类内分泌干扰物可以通过与雌激素受体结合或影响细胞信号转导途径等方式模仿或部分模仿雌激素,发挥类似于雌激素的效应,称为环境雌激素。壬基酚(NP)、辛基酚(OP)、二氯酚(2,4-DCP)和双酚A (BPA)是酚类化合物中具有代表性的拟雌激素类内分泌干扰物。1998年美国环保署建立了一个分级筛选和测试EDCs的测设框架体系,其中雌激素受体结合测试法是此筛选体系的组成部分,且因其方便快捷而成为目前应用最广泛的离体筛选方法。由于传统的雌激素受体结合测试法使用放射性标记化合物,容易造成放射性污染,因此本研究尝试将酶联免疫技术应用到雌激素受体结合试验中,以避免放射性污染,同时应用此方法测定四种酚类物质的雌激素受体结合能力,并分析其潜在雌激素效应。
本研究在传统的雌激素受体结合试验方法基础上,引入竞争酶联免疫技术,避免放射性污染的同时提高了灵敏度,可以作为今后EDCs筛选体系的备选方法,但由于此方法还未进行推广,缺乏实验室间比对数据,因此还需进行大量室内研究以及与其他内分泌干扰物筛选方法的比对研究。
根据此结合试验方法测定了四种酚类内分泌干扰物及己烯雌酚(DES)的雌激素活性,结果表明：四种酚类物质均具有雌激素活性,且其相对于DES的雌激素结合能力顺序为,BPA t-OP NP 2,4-DCP,2,4-DCP的雌激素活性最弱。BPA相对于DES的相对雌激素受体结合能力(RBA)为2.1×10-3，,与t-OP的1.2×10-3在同一个数量级水平上；NP的RBA为7.3×10-4,与2,4-DCP的5.3×10-4在同一数量级水平上。当四种酚类物质分别以等毒性单位比和等环境浓度比混合时,其联合作用表现为部分相加或拮抗作用。
由于酚类内分泌干扰物的广泛应用及已报道的越来越严重的水体污染,对四种酚类物质污染的预警作用越来越重要。因此本研究试图以蛤蜊为受体生物,通过四种酚类物质对生物体内抗氧化酶包括超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)以及解毒酶谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性的影响研究,分析三种酶活性对酚类污染的响应,试图通过多种酶活变化指示水体污染状况。研究结果表明：对于壬基酚,二氯酚和双酚A,CAT和SOD的变化趋势一致,且二者呈现较好的相关性。对于壬基酚和二氯酚,CAT和SOD活力随浓度升高表现为持续下降趋势,而GST表现为先升高后下降的趋势；对于BPA, CAT和SOD活力随浓度上升表现为先上升后下降的趋势,而GST则表现为持续下降的趋势。由此可见,对于这三种酚类内分泌干扰物,三种酶活变化呈现较好的规律性,因此可以联合三种酶活变化分析判断水体中壬基酚、二氯酚和双酚A的污染,以期对水体中酚类物质污染进行预警。但是对于辛基酚,这三种酶活变化未呈现较为明显的规律性,因此无法通过三种酶活变化指示水体中辛基酚污染,这可能是由于抗氧化酶系和解毒酶变化受多种因素影响,实验室间数据对比以及野外实验还有待进一步研究。
【关键词】：
【学位授予单位】：中国海洋大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2010【分类号】：Q55【目录】：
Abstract7-13
1 前言13-29
1.1 内分泌干扰物的研究概况13-15
1.1.1 内分泌干扰物的概念13-14
1.1.2 内分泌干扰物的效应研究14-15
1.2 酚类内分泌干扰物的研究概况15-20
1.2.1 四种酚类的分布和使用情况15-16
1.2.2 四种酚类的环境分布16-17
1.2.3 四种酚类的毒理学效应研究17-20
1.3 雌激素受体结合测试法20-24
1.3.1 筛选方法体系20-21
1.3.2 可能的作用机制21-22
1.3.3 ER结合测试法研究进展22-23
1.3.4 应用ER结合测试法对酚类物质的研究23-24
1.4 酶作为生物标志物的研究24-27
1.4.1 提出生物监测的必要及生物标志物概念24
1.4.2 CAT和SOD酶作为生物标志物的研究24-25
1.4.3 GST酶作为生物标志物的研究25-26
1.4.4 多种酶活性变化作为生物标志物研究26-27
1.5 本文研究内容、目的及意义27-29
1.5.1 研究内容27-28
1.5.2 研究目的及意义28-29
2 酚类物质的单独及联合雌激素活性研究29-43
2.1 单个酚类的雌激素受体结合试验29-34
2.1.1 试验仪器和试验材料29-30
2.1.2 试验方法30-33
2.1.2.1 受试物的配制及浓度设置30
2.1.2.2 受体竞争结合试验30-31
2.1.2.3 抗原抗体竞争结合试验31
2.1.2.4 显色反应31
2.1.2.5 酶标仪测定31
2.1.2.6 数据分析31-33
2.1.3 试验结果33-34
2.2 酚类的联合雌激素活性34-39
2.2.1 试验仪器和材料34-35
2.2.2 试验方法35
2.2.3 试验结果35-39
2.2.3.1 联合作用评价方法体系35-36
2.2.3.2 等毒性比混合物联合效应36-38
2.2.3.3 等环境浓度比混合物联合效应38-39
2.3 讨论39-42
2.3.1 ER-ELISA检测方法39
2.3.2 受体结合法的影响因素39-40
2.3.3 酚类物质的单个雌激素活性40-42
2.3.4 酚类物质的联合雌激素活性42
2.4 小结42-43
3 酚类物质对蛤蜊酶活性的诱导43-59
3.1 材料与方法43-44
3.1.1 受试生物43
3.1.2 试验仪器和试剂43-44
3.1.2.1 试验仪器43
3.1.2.2 试验试剂43-44
3.2 试验试剂的配制44
3.3 暴露试验44-45
3.4 酶源的制备45
3.5 酶蛋白的测定45
3.6 酶活性的测定45-48
3.6.1 SOD酶活性的测定45-46
3.6.2 CAT酶活性测定46-47
3.6.3 GST酶活性的测定47-48
3.7 数据处理及分析方法48
3.8 试验结果48-57
3.8.1 四种酚类化合物对内脏SOD酶活性的影响48-49
3.8.2 四种酚类对腮中SOD酶活性的影响49-50
3.8.3 四种酚类对肝脏中CAT酶活性的影响50
3.8.4 四种酚类对腮中CAT酶活性的影响50-51
3.8.5 四种酚类对肝脏中GST酶活性的影响51-52
3.8.6 四种酚类对腮中GST酶活性的影响52-53
3.8.7 壬基酚对SOD、CAT、GST酶活性的影响53-54
3.8.8 辛基酚对SOD、CAT、GST酶活性的影响54-55
3.8.9 双酚A对SOD、CAT、GST酶活性的影响55-56
3.8.10 二氯酚对SOD、CAT、GST酶活性的影响56-57
3.9 讨论与分析57-58
3.10 小结58-59
参考文献59-70
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果72
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